细胞外囊泡和体外诊断

9.1 外囊泡的分离方法

1. 差速超速离心：最广泛使用，被视为“金标准”
2. 密度梯度超速离心
3. 免疫分离：使用免疫磁珠，捕获膜表面特定蛋白质的细胞外囊泡
4. 聚合沉淀：利用聚乙二醇一类的聚合物能促使细胞外囊泡沉淀
5. 切向流超滤：孔径大于Evs粒径的滤膜除去大颗粒，然后用孔径小的超滤膜截留细胞外囊泡
6. 尺寸排阻色谱：利用排阻层析柱里的多孔固定相，使较小的颗粒在柱子里的保留时间更长，实现按粒径大小对样品进行分离
7. 微流控芯片分离：用纳米材料或芯片捕获微流体中的细胞外囊泡

9.2 外囊泡的提纯方法

1. 超速离心
2. 梯度离心：超速离心+梯度离心实现细胞外囊泡的富集和纯化
3. 磁珠捕获：利用细胞外囊泡的细胞膜上的常见标志物，通过抗原-抗体进行特异性捕获
4. 尺寸排阻色谱法（凝胶色谱法）：按照分子量大小进行分离的色谱方法

9.3 外囊泡的鉴定方法

1. 流式细胞仪：通过粒径和内容物
2. 电镜：观察形态
3. DLS,NTA等：观察粒径大小和分布
4. 浓度检测
5. 内容物检测：核酸，蛋白质，脂类等